تقسيم فطر التريكودرما
على الصفات المزرعية والشكلية لمزارع التريكودرما النامى على بيئة أجار مستخلص المولت 2% المكونة من (20جم مستخلص مولت أوكسويد ، 20جم أجار على لتر ماء مقطر) وتعقيمها مرتين كل مره 15دقيقة على 121 و15 رطل / بوصةوإعتبرت هذه البينه قياسية إستخدمت خلال هذه الدراسة.
- وكل عزلات هذا الفطر نمت فى أطباق بترى 9سم وتم تحضينها 1-2 يوم على 25م فى الظلام ثم حضنت لتتجرثم تحت ظروف حرارة الغرفة العادية وتحت مصدر إضاءة صناعى.
- وتم تكرار الفحص الميكروسكوبى والماكروسكوبى لكل عزلة.
- وبالنسبة للتفاصيل الدقيقة من حيث فحص نظام التفريع للحوامل الكويندية والفرعيات وطريقة خروجها فإنه تم دراسة ذلك على شرائح معده لهذا الغرض وذلك من مزارع لم تصل إلى المراحل النهائية للتلوين فيها .
- وذلك لإنه فى حالة المزارع القديمة المسنة يصعب وضوح أو تفسير طريق خروج الفريعات والذنيبات على الحامل الكويندى.
- ويمكن دراسة وتحديد حجم وشكل وجود أو غياب تلون الجراثيم عند عمر أسبوعين للمزرعة ويتم صبغ كل الشرائح بواسطة محلول صبغة أزرق القطن فى حمض لاكتيك – وتم تقدير كل القياسات المطلوبة فى بيئة تحميل . وقد إستخدمت العدسات الزيتية 100 X بصورة متغيرة فى فحص وقياس هيفات الفطر والجراثيم الكلاميدية والحوامل الكويندية . والتفريعات phialides والجراثيم وقد تم رسم كل أشكال الفطريات بإستخدام كاميرا لوسيدا camera lucida .
- وبما أنه من المتوقع أن تقارب الأنواع فى داخل إطار محدود سوف يتم بلورتة فى المستقبل وذلك لتجنب حدوث أى تداخل فى المصادر المرجعيةللأبحاث أو سوء إستعمال قد أتم لأسماء المرادفه للفطر.
عدد العزلات التى تم إقتباسها أو تسجيلها فى هذا البحث قد كانت فى أضيق الحدود. ولتجنب إمكانية حدوث خلط بين أثنين أو أكثر من الأنواع المتقاربة للفطر فإنه تم وصف كل تجمع من عزلات بتعريف أحد العزلات النموذجية الممثلة لها فقط.
- والعزلات أو الطرز التى تم تعريفها فى هذا البحث قد تم إيداعها فى المعشبة الفطرية لقسم النبات فى جامعة شيفلد بإنجلترا.
- ونفس العزلات فى صورة مجففه تم حفظها فى معشبة بوجورينز فى ولاية جافا أو (باجور) بأندونسيا .
الشكل العام للأنواع تحت جنس الترايكودرما تتشابه إلى حد كبيرفى الشكل المورفولوجى بدون أى تباين واضح كما يحدث فى أنواع الاجناس الأخرى فى صف HYPHOMYCETES ولهذا فإنه سوف نستعرض عدد قليل من الخصائص المورفولوجيه ذات الأهمية التقسيمية.
ووجود مجموعة الأنواع فى جنس غالباً الترايكورد غالبا ما يحدث تداخل فى الصفات وهذا أيضاً سوف يحبط أى محاولة لتقسيم العزلات أو يجعل ذلك مهمة صعبة. ومن الواضح أن تقييم تلك الخصائص المحدودة من الصفات المورفولوجيه عمل هام جداً وفى الصفحات القادمة سوف نرى محاولة لدراسة إلى أى مدى يمكن إستخدام كل من هذه الصفات فى دراسة مجاميع العزلات المتشابهه فى جنس الترايكوردما.
المستعمرات Colonies
أنواع الترايكودرما قد تكون فى صورة مزارع تأخذ شكل شعيرات صوف مفككه fioccose أو الخصل المندمجة compact tubted- ويوجد طرز وسيطة عديدة بين هذين الشكلين وقد يوجد كلاهما فى نفس المزرعة .
ويرجع مظهر الأندماجcompactness فى مزارع الترايكودرما إلى تركيب الحوامل الكويندية.
- ففى فطرT. hamatum (Bon . ) تتكون دائماً المزارع ذات مظهر الخصل المندمجة ويمكن للفرد أن يلاحظ أن نظام التفريع فى الحوامل الكونيدية فى مجاميع الأنواع تحت هذا الفطر عملية معقدة جداً.
فى معظم أنواع الترايكودرما يلاحظ أن المساحات الكونيدية تكون متقاربة وتشبه الحلقات التى يمكن رؤيتها تتوسط المزرعه تحت الضوء.
- وعندما تكون المزارع ذات نمو أقدم تكون المناطق الخلقية أقل وضوحاً بسبب تكون حوامل كونيدية جديدة خارج نطاق المنطقة الحلقية الكونيدية. أما العزلات ذات الشكل المفكك يمكن أن نلاحظ مظهر مناطق الحلقات عند مرحلة النمو الحديث فقط للمستعمرات.
- ويرجع لون المستعمرة إلى الصبغات فى الجراثيم phialospores ، واللون الاصلى أو النموذجى فى مستعمرات فطر .virid T يكون أخضر داكن ولكن كما فى بعض مجاميع الأنواع other aggregates نجد أن بعض العزلات فى هذه الأنواع يحدث فيها تغيير وإختلاف كلى فى اللون يتدرج من اللون الاصفر الى اللون الأخضر المصفر أو الأخضر الفاتح أما الجراثيم فى النوع الأبيض المسمى I .polysporum تظهر عديمة اللون (Linkex Pers . ) Rifai عندما تعرض إلى الضوء بصورة فردية تحت الميكرسكوب.
إلى جانب الصبغ واللون فى الجراثيم الكويندية هناك عوامل أخرى تؤثر على اللون فى المزرعة . كمية الجراثيم المنتجة أو المتكونه هى على سبيل المثال تجعل لون المستعمرة داكن أو فاتح . بعض العزلات تنتج بللورات أو إفرازات من الصبغات تعمل على صبغ البيته الموجودة بها. أيضاً درجة حموض الوسطPHالذى تنمو فيه المستعمره يؤثر على لونها . ووجود الهيفات العقيمة المطاولة التى تنمو فوق الحوامل الكويندية فى فطرT.hamatum يجعل المستعمرة تتميز باللون الأخضر المبيض او المائل للأبيض.
وبالرغم من ان بعض الباحثين يستخدم هذه الصفات الماكروسكوبية كوسيلة سريعة للتعرف على الثلاثة أنواع السابق ذكرها فإنه يوجد تباين بين أنواع الترايكوردما فى الطور الجنسى H.rufa ويتضح من خلالها أن هذه الصفات يجب أن لا تستخدم كمعيار اساسى فى تقسيم الأنواع فى جنس الترايكودرما.
والمثال على ذلك النوعين T. rigrovirens الذى قام بتعريفها)Gilman,Abbott (1927) , Abbott (1926) و T.lignorum الذى قام بتعريفه ( 1913 ) Goddard معتمدين فقط على مفتاح الصفات الماكروسكوبية هما نوعين متشابهين.
- ومع هذا فإن التحليل الدقيق للوصف الأصلى والإيضاحات الخاصة بالتركيب الدقيق لفطر T. nigrovirens تشير إلى أن هذا النوع لا يمت بصلة للترايكودرما.
وقام Webster,Rifai سنة ( 1965) بمقارنة الطورالكويندى لفطر Thuemenella britannica فوجدوا أنه يشبة الفطر الترايكودرما.
الحوامل الكويندية Conidiophores
كما سبق أيضاحة أن الحامل الكويندى لفطر التريكودرما يأخذ الشكل المخروطى أو الهرمى فى المنظر العام له. وكما هو متوقع فإن طول الفروع الجانبية التى تخرج من على الفرع الرئيسى من كل حامل كويندى تزداد طولياً وبنسب مع بعد المسافه عن قمة الحامل.
وبشكل عام يمكن القول بأن كل فرع جانبى هو صورة مصغرة لما يحمله وذلك لأنه يخرج أيضاً منه فروع جانبية أصغر وهكذا.
فى فطر T. homatum وفطر T. polysporum نجد أن الفروع الرئيسية فى الحامل الكويندى هى طويلة نسبياً ولكن بها فروع جانبية اقصر وأسمك . وفى معظم العزلات من مجاميع هذين النوعين نجد أن منطقة القمة فى كل فرع رئيسى تنتهى بشكل هيفا إستطالة عقيمة تشبة السوط.
وفى عدد من العزلات التى تم فحصها نجد أن إستطالة هذه الهيفات العقيمة يمكن أن تختزل أو تقصر كلياً وتنتهى قمة الحاملPhialide أو أنه يصبح خصب fertile كما هو الحال فى بقية أنواع التريكودرما ولهذا فإنها من حيث المنظر السطحى فإنها قد تشبه الحوامل الكوينيدية فى جنس Sotryesporium ( Corda) ( منظر p . v )
فطر T longibrachiatum به أيضاً فروع رئيسية طويلة من الحوامل الكوينيدية تحمل فروع جانبية قصيرة ولكنها لا تشبه تلك الموجودة فى خطر T.hamatum أو فطر T. polysporum من حيث تركيب الحامل الكويندى والذى يكون بسيط جداً وذلك لإنها تنتج أو تكون عدد بسيط جداً من الفروع الجانبية والتى تظهر فى صورة تركيب بسيط لحامل.
الحوامل الكويندية فى فطرياتT. koningii , T. viride والأنواع القريبة الصلة فيها تأخذ الشكل الشجيرى كما هو الحال فى شكل الحامل الكويندى لفطر sp. Verticillium والشكل النموذجى للحوامل الكويندية فى الأنواع المختلفة والذى تم شرحة فيما سبق لابد من فحص على شرائح يتم تحضيرها من مناطق فصل النموات الكونيدية المندمجة للفطر فقط بينما خارج هذه المناطق المندمجة النمو يكون النمو أقل تعقيداً ولا يوجد به حوامل كوينيدية ذات مظهر نموذجى للنوع.
التفرعات Phialides
التفرعات الموجود فى انواع جنس التريكودرما تأخذ معظمها شكل الدورق وهى ناحية القاعدة أكثر من منطقة الوسط ثم تستدق ناحية القمة التى تأخذ الشكل المخروطى الضيق شبه الإسطوانى فى منطقة العنق.
وهذه الفريعات تخرج من على الحامل بزاوية متسعة تشبه للحامل الذى يحملها فلهذا فإنها تظهر فى الشكل الجانبى فإنها تأخذ شكل القرن shapedcorn باستئناف تلك التفرعات التى تكون فى أطراف الحامل الكويندى فإنه التفرعات تكون فى ترتيب غير منتظم حول محيط الحامل الكويندى فى ترتيب يصل إلى 5 دورات حتى المقطع قبل الأخير فى نهاية الحامل الكويندى أو التفرعات الجانبية أو إنها تنشا على طول الحامل الكويندى أو الفروع الجانبية من الحامل فرادى وتتبادل فى الوضع أو تكون فى ازدواج ذات وضع مضاد أو وفى معظم الأحوال فإن التفرعات الطرفية تكون أطول قليلاً عن تلك التى تنشأ أسفلها . وهكذا فإنه يبدو وأن هناك علاقة جيدة بين طراز أو طريقة التفريغ على الحوامل الكويندية ووضع التفرعات عليها وأن التشابه بين الطور الفرتسليومى verticillium لكل من فطرى Nectaria inventa وفطر T.koningii والأنواع الحليفة لها يكون واضح كثيراً عند مقارنة مواضع الذنبيات على حواملها الكويندية .
وبصفة عامة فإن التفرعات فى فطرT.koningii تبدو اكثر سمكاً وقصيرة وتميل للخروج من على الحامل فى زاوية واسعة أكثر من تلك الموجودة فى فطر Verticillium وزيادة على ذلك فإن الترتيب السوارى للتفرعات فى فطر التريكودرما ليس منتظماً كما هو الحال فى فطر الفرتسليوم وذلك لأن هذا الجنس (Trichoderma)
التفرعات لا تنشأ عادة عند نفس المستوى ( منظر رقم 2ج ) ولهذه الأسباب فإن الطور الكويندى للفطر Hypocerea loctea ) قد أستبعد من التقسيم تحت جنس الترايكودرما وبنفس الاسلوب الفطر H.hunua فى طورة الكويندى (منظر 3) والذى يعتبر مماثل ومطابق لفطر T.virideكما وصفه Dingley ( 1957 ) أما فى الدراسة الحالية فإنه لم يتم تصنيفها كأنواع من جنس الترايكودرما.
وعندما يتم معرفة المزيد من المحددات أو الحدود المرسومة لتصنيف كلاً من التريكودرما والفرتسليوم فإنه من الضرورى يجب أن نكبر المنظور العام للتريكودرما المدروسة فى هذا البحث لكىيتم وصفها فى الطور الكويندى لهذه الأنواع وكذلك الصور أو الأشكال القريبة الصلة منها.
فى معظم عزلات T. viride يوجد طرز وخصائص مختلفة من التفرعات phialides من حيث موقعها وترتيبها على الحامل الكويندى . كما هو موضح فى (الشكل2ا) وفى هذه المجموعه من العزلات يكون نظام التفريع للحوامل الكويندية بسيطاً وأقل إنتظاماً وتكون عليه التفريعات أقل تزاحماً كما هو ملاحظ فى النوع T. koningi والأنواع القريبة الصلة بها ولهذا فإنها تزداد التشابه بينها وبين الفرتسليوم .
والحامل الكويندى البسيط فى النوع T.longibrachiatum الموضح فى الشكل (2ب) والذى يحمل تفرعات تحمل مباشرة عليها وبصورة فردية ويكون ترتيبها عادة على مسافات متسعة أو غير منتظمة أو قد تكون أيضاً فى شكل مجموعه صغيرة.
وعند فحص جزء صغير من الفرع الرئيسى للحامل الكويندى فإنه يشابة لحد كبير نظام ترتيب وخروج التفرعات على الحامل كما فى الفطر Cephalosporium ( Corda). فى الأنواع T. varions , T. desrochii يلاحظ نظام خروج أو مواضع التفرعات على الحامل الكويندى يشابه تلك الموجودة فى الفطر T. longibrachiotum بالرغم من T. vorions قد وصفت مستعمراته بانها ذات لون قرنفلى Pinkish , التفرعات تاخذ شكل أنبوبى أو أسطوانىو تحمل جراثيم علىشكل سلسلة بينما النوع T.desrochii ذات لون قرنفلى أما جراثيمها تأخذ الشكل المغزلى spindle or sickle ولهذا السبب فإنه من غير المستحب أو المقبول أن يتم تصنيف أو تسكين هذه الأنواع في الجنس Trichoderma .
أما نظـام ترتيـب وخـروج التفرعـات فـى كـلا النوعيـن T .hamatum و T. polysporum متميز جداً حيث أن التفرعات النموذجية التى تتكون على خصل الحوامل الكوينيدية المتزاحمة فى المناطق الكوينيدية تكون قصيرة وتأخذ الشكل الكمثرى إلى البيضاوى وهى فى العادة هى أنواع متقاربة إلى بعضها البعض وذات فروع قصبرة وسميكة أما النوع T.piluliferum الموضح فى الشكل ( 4 ) يعتبر ذات نظام ترتيب ووضع أخر للتفرعات وذلك لإنها تنضم الى طراز تفريع النتؤات لمجموعة T.koningii وكذلك نظام توزيع الحوامل الكونيدية والتفرعات فى الطراز T.hamatum وكما تم الاشارة الية مسبقا فانة من الصعب توضيح كل الخصائص للتفرعات والحوامل الكوينيدية وذلك لأنها عند مرحلة النضج فى المزارع تكون قد تشابكت وأنهار النظام بها ويصعب تحديدة .
وهذه الظاهرة يمكن الإستفادة منها كأداة للفصل أو التفرقة بين أنواع التريكودرما وأجناس الفطريات الأخرى المشابهه مثل Verticillium أوGliociadium .
حديثاً وفى السنوات ألاخيرة أستخدمت الذنييات phialides فى الفصل والتمييز بين الأجناس فى صف فطريات hyphomycetes فقد وجد ت خصائص معينة مثل تركيب الحوامل الكويندية وحجمها وشكلها وترتيب ووضع خروج التفرعات فى جنس التريكودرما من الخصائص الهامه جداً فى التفرقة بين الأنواع ودراسة العلاقة بينها وإن أستخدام هذه الخصائص فى الناحية التقسيمية يجب أن لا يستخدم فقط بل إذا كانت هناك أى محاولة لنظم طبيعية لتقسيم الترايكودرما فى المستقبل فيجب البعد عن الخصائص الأخرى المشكوك فيها مثل الشكل المظهرى للمزارع macroscopic characters .
الجراثيم Phialospores
بإستثناء النوع viride T فا نه من الصعب الوصول إلى صفة مناسبة للتميز بين الجراثيم . ولكن بالتدقيق فى شكل الجراثيم بعناية فائقة مع ربطها بخصائص مورفولوجيه أخرى .
وجد أن الغالبية العظمى من الجراثيم phialaspores فى عزلات فطر T. vivride جراثيم تأخذ الشكل Subgloboseبينما وجد فى بعض العزلات الأخرى لهذا النوع تكون جراثيم تأخذ الشكل Obviodأو Eleipsoidal . وبالفحص الميكروسكوبى بإستخدام العدسة الزيتية قد وجدت أن جدرانها خشنه rough walls .
فى الأنواع T. longibrachiatum ، T .hamatum نجد أن الجراثيم ذات الحجم المتوسط إلى الكبير تتر اوح أطوالها من 4-9 ميكرون وعلى العكس نجد أن معظم الجرائيم ذات الشكل subglobese وذات الجدار الملساء فى النوع T.hazianumr.كانت صغيرةالحجم وقطرها 2 .7 ميكرون والقليل منها قطرة 4 ميكرون وكما فى T.harzianum نجد أن النوعين السابقين كانت الجراثيم فيهما تأخذ الشكل OBLONG OROBLONG - ellipsoidal وهى تشابه به أيضاً الجراثيم فى النوع T.koningii
الباحثانOudemans , Koning ( 1902 ) أعتمدا على خصائص أبعاد الجراثيم وطريقة تجمعها على قمة التفرعات أو الرؤؤس الكويندية كصفات تقسيمية للتفرقة والتمييز بين أنواع الترايكودرما . بينما كان BISBY 1939 يشير إلى عدم جدوى هذه الصفات من الناحية التقسيمية على مستوى النوع داخل الجنس.
الجراثيم الكلاميدبه Chlamydospores
لوحظت الجراثيم الكلاميدية بصورة متفاوتة فى عزلات فطر التريكودرما وكانت موجودة غالبا بصورة بين خلويه ونادراً ما كانت توجد فى الأطراف الهيفات FERMINAL وتأخذ الشكل البيضاوى إلى المتطاول . وكانت هناك إختلاف فى نسبة تواجدها وكذلك حجمها سواء كانت فى البينه أو على الحقيقات الهوائية.
فى هذه الدراسة كانت عزلات الترايكودرما ذات خصائص أو صفات متشابهه فى التراكيب الثمرية بالرغم من إنها تتباين فى تكرار حدوث او تكوين الجراثيم الكلاميدية بشكل ملحوظ وبهذا أعتبرت الجراثيم الكلاميدية من الخصائص التقسيمية الثانوية .
بعض الخصائص الأخرى ذات الأهمية التقسيمية :
وجد أن كل عزلات الترايكودرما ذات السطح الخشن فى جدر جراثيمها تكون مزارعها ذات رائحة جوزالهند المميزة . وهذه الخاصية هامة فى التعرف على T.viride وخاصة فى عزلاتها التى تفشل فى إحداث تجرثيمها .
أما بالنسبة للاصباغ التى تفرزها مزارع الترايكودرما فى بيئة النمو ذات أهمية محدودة كصفة تقسيمية.
العديد من العزلات فى الأنواع ذات الجراثيم البيضاوية خاصة فى النوعT.aureviride غالباً ما تصبغ البيئة وهناك عدد محدود من المزارع النموذجية للنوع T,virideالمقدرة على تكوين صبغات فى بيئه النمو .
أما بالنسبة T.polsporium او T. hamatum هى بصفة عامه ذات معدل نمو أبطأ بدرجة طفيفة عن مجموعة عزلات الأنواع الأخرى .
كذلك وجد WebsterوRoli ان هناك اختلافات بين العزلات فى مختلف الأنواع من حيث النمو الطولى LINEAS EAPONSION تحت درجات حرارة مثلى فى ظروف النمو .
وفيما يتعلق بإستخدام الخصائص الفسيولوجية كصفات تقسيمية فى أنواع هذا الجنس لم تظهر حتى الأن دراسات حول هذا الموضوع.
تقسيم جنس الترايكودرما :
تنمو مستعمرات هذا الفطر بسرعة فى المزارع ففى البداية تكون مسطحة ناعمه وذات لون أبيض مائى إلى شفاف غالباً تم فى النهاية تصبح فى شكل خصل مندمجة ذات درجات متدرجة من اللون الأخضر أو أحياناً ذات لون أبيض .
- أحياناً يفرز الفطر صبغات فى بيئه النمو أو يظل لون البيئة بدون تغيير.
- هناك رائحة مميزة ( رائحة جوز الهند ) تعطيها عزلات فى بعض الأنواع.
يتكون ميسليوم هذا الفطر من هيفات ذات جدر ناعمة وتقسم بجدر عرضية ومتفرعه وجراثيمه ذات لون شفاف.
تتكون جراثيم كلاميدية فى معظم الأنواع وهى تتكون بصورة بين خلوية أو أحياناً تكون طرفية terminal على الفروع القصيرة الجانبية من الهيفات وتأخذ الشكل البيضاوى أو المتطاول وهى عديمة اللون وذات سطح أملس. الحوامل الكويندية متفرعه بدرجة كبيرة ومفككه أو مندمجه وهى بصورة .
عامه تتكون فى مناطق دائرية تشبه الحلقات أو تتكون بصورة فردية أو غير منتظمة على الهيفات الهوائية .
- الفروع الرئيسية للحوامل الكويندية تكون عدد كبير هذه الفريعات الجانبية قصيرة وهي تنشأ فرادى أو فى مجاميع غالباً يصل عددها إلى 3 فريعات وهذه الفريعات بدورها تعطى فريعات أخرى ثانوية وهكذا ...
- وهذه الفروع والفريعات تخرج من على منشأها بزاوية واسعة wideangle يزداد كل الفرع أو الفريعات بزيادة المسافة بعداً عن قمة الفرع الذى يعلوها ولهذا فإن الفروع الرئيسية على الحوامل الكويندية تأخذ الشكل المخروطى بصفة عامة وقمة كل فرع تنتهى بذنيب phialide باستثناء الأنواع T. polysperum او T.hamatum حيث يكون الفروع الرئيسية على الحوامل الكويندية تنتهى بهيفا طويله عقيمة مستقيمة او مقوسة او تشبه السوط .
- أما الذنيبات فهى تشبه الدورق flasks أو الشكل الكمثريpine shaped أو البيضاوى فى الغالب وهى فى الغالب ذات قاعدة ضيقة تنتفخ قليلاً عند أو أعلى منطقة الوسط ثم تستدق يتدرج حتى قمتها لتشبه العنق المخروطى الضيق أو شبة ا لإسطوانى . وبالمثل فإن الفروع تكون محمولة على الحوامل الكويندية بزاوية متسعة من على منشأها أو بنقطة خروجها وتكون متقاربة فى ترتيب دائرى أسفل الذنيبات الطرفية أو تخرج على مسافات فى مجاميع أو أحياناً فرادى على مسافات غير منتظمة ويكون وضعها لبعضها متبادل أو متضاد alternate or opposite
- الجراثيم الكويندية هى جراثيم لزجة slimy phiolospores تنشأ فردية وبالتتابع وتكون متجمعه فى قمة ذنيب ليعطى الشكل البيضاوى أو الشبة بيضاوى لرأس كويندية ذات قطر فى الغالب أقل من 15 ميكرون .
- ونادراً جداً ما تكون فى صورة سلسلة قصيرة وأحياناً تلتصق الرؤؤس الكويندية المتجاورة لتكون راس كويندية أكبر .
- هذه الجراثيم ذات جدر ناعمه أو ذات جدر بها تخشين دقيق ولونها شفاف أخضر مصفر أو اخضر داكن. شكلها شبه بيضاوى إلى كروى متطاولة غالباً إلى إسطوانية متطاولة وأحياناً تظهر فى شكل زاوى ngular وذات قاعدة.Truncat الجرثومة الصغيرة حديثة التكوين يظهر بها فجوات زيتية عديدة تختفى عند النضج .توصف بعض الأنواع بإنها الطور الكويندى لأنواع جنس Hypocrea .
مفتاح تقسيم تجمعات تقسيم الانواع فى جنس الترايكودرما
Key to species aggregates of trichoderma
A) الحوامل كويندية طويلة وسميكه ويظهر بها غالباً هيفات مطاولة عقيمة والفروع الجانبية معظمها قصير وسميك ، تحمل ذنبيات متزاحمه قصيره ممتلئه ، ومستعمراتها ذات لون أبيض أو أخضر مائل للأبيض أو أخضر داكن وتظهر بها حوامل كويندية فى شكل خصل مندمجة .
B ) الهيفات العقيمة المطاولة غير موجودة والجراثيم كروية الشكل شفاف T. piluliferum
C ) الهيفات العقيمة المطاولة موجودة أو متحورة أو نادرة الوجود والجراثيم ليست كروية الشكل ذات لون شفاف أو أخضر .
Bb ) الجراثيم شفافة وصغيرة الحجم T. polysporum
C ) الجراثيم ذات اللون أخضر صغيرة إلى كبيرة الحجم T. hamatum
Aa) االحوامل الكويندية وفروعها الجانبية طويلة إسطوانية ولا توجد بها هيفات عقيمة مطاولة والذنيبات غير متزاحمة تميل للشكل الإسطوانى ومستعمراتها تاخذ اللون الأصفر اللامع إلى الأخضر الشاحب أو الباهت والحوامل الكويندية مفككة أو مندمجة فى خصل .
D ) الجراثيم ذات أسطح أو جدر ناعمه .
E ) الحوامل الكويندية ذات نظام تفريع معقد أو شجيرى والذنيبات phialides تخرج من مواضع منتظمة وتشبه الفرتسليوم .
F ) الجراثيم مطاولة أو بيضاوية وغالباً ما تظهر زاوية angular الشكل T.koningii
Ff ) الجراثيم شبه بيضاوية ذات قاعدة عريضة المستعمرات عديمة اللون من ناحية ظهر الطبق T. aureoviride
Fff )الجراثيم كروية أو شبه كروية أو بيضاوية قصيرة وذات أبعاد ( طول وعرض ) أقل من 1.25 ميكرون T. harzianum .
Ee )ا لحوامل الكويندية ذات نظام تفريع بسيط الذنيبات تخرج من مواقع غير منتظمة وغالباً ما تظهر فردية وتشبه نظام التفريع فى فطرCephalosporium
G ) الجراثيم كبيرة ويصل طولها الى 7 ميكرون مطاولة أو بيضاوية والذنيبات دقيقه ناحية القاعدة غالباً T. longibrachiatum
Gg ) الجراثيم صغيرة 2.8 – 4.8 ميكرون فى الطول وهى مطاولة أو بيضاوية أما الذنيبـات رقيقـة ناحيـة القاعـدة غالباً ونظـام التفريـغ فى الحوامل الكويندية معقد T. pseudokoningii
Dd )الجراثيم ذات جدر خشنه T. viride
توجد الجراثيم الشفافة والكروية لهذا النوع من الترايكودرما ونظام التفريع فى الحوامل الكويندية يشبه إلى حد كبير بنظام التفريغ فى T. koningii ولكن الحوامل الكويندية هنا ذات أفرع سميكة قصيرة وتخرج من عليها فريعات متزاحمة منتظمة وتحمل عدة ذنيبات Plump تشبه تلك الموجودة فى النوع T. hamatum .
1- Trichoderma piluliferum
هذه الجراثيم تكون شفافة كروية علىTrichoderma تكون شاذة إلى حدما فنظام التفريع لهذه الكونيديات تشبه لحد ما T. koningii لكن الكونيديات يكون لها أفرع سميكه تنتج تاج منتظم مكونه بذلك phialides متنوعه وقصيرة كما فى T. piluliferum علي أى حال على تستطيل الهيفات والتى تميز النوع الأخير بينما لا تتواجد فى T. Piluliferum فلونها أبيض وتكورها يشبه بذلك .album Tوهذا النوع الأخير يقترح أن يتواجد به حواجز " شعيرات " على مستعمراته . ومن الناحية الميكروسكوبية فهذه الأنواع تشبه الانواع البيضاء منT . polysporum ولكن النوع الأخير له جراثيم أهليجية وهيفات مستطيلة فكونيديات وجراثيم T. Piluliferum قد يشار إليها علي أنها Gliocladium virens لكن يلاحظ تواجد كونيديات تشبه Glioclodium فى الأنواع السابقة.
تنمو المستعمرات بطيئة نوعاً فى حرارة الغرفة وتكون لها أسطح ناعمه بيضاء مائية ويتوزع الميسليوم على سطح البيئة . وعند النضج تكون الكونيديات بيضاء تماماً فى حين تبقى الأجزاء المعاكسة غير ملونه . ويتكون الميسليوم من جدار ناعم ذات حواجز وهيفات غير ملونه يصل قطرها 10ميكرون . وتتفرع منفصلة وفى بعض الأحيان تلتحم مع بعضها البعض . الجراثيم الكلاميدية تتجمع بالتالى فى كرويات أو أشكال أهليجية . ذات جدر ناعمه غير ملونه تكون طرفية أو وسطية ويصل قطرها إلى 12m وتبدو الكونيديات فى شكل مدمج غير منتظم متبعثرة على سطح المستعمرات أو تتجمع فى مناطق . والأفرع الرئيسية للكونديات عندما يصل فرعها 5, 7 u تنتج عدد من الأفرع والتى تزداد بالبعد عن المحور الحامل . وتكون هذه الأفرع الجانبية غليظة ومنتظمة فى مجاميع 2 أو 3 وأحياناً فردية وقد تنتج أفرع جانبية أصغر وخصوصاً الأفرع السفلية. وقمة كل فرع تنتهى بذنيبات phialide وتكون phialide قصيرة وحجمها 2.8 - 3.5 m ) × ( 4.5 - 6.5 فى حين أن phialide الطرفية تصل إلى 10m ويظهرا غلبها فى شكل غير منتظم من 2- 5 وحدات أسفل phialides الطرفية وأحياناً من تحت الخلية قبل الأخيرة للفرع . وتشبه phialides القاروره القصيرة وتكون ضيقة فى القاعدة عنها فى المنتصف تميل إلى الشكل الكمثرى وحتى الشكل الأسطوانى المخروطى . وفى المظهر الجانبى تكون غير مماثلة لأنها قد تنثنى تجاه القمة لذلك قد يكون إتجاهها موازياً للذنيبات phialide الطرفية وجراثيم phialospores تنتج فردياً وبالتتابع وتتجمع فى القمة من كل phialide لتكون فى البداية تجمع كويندى ولكن فى بعض الأحيان تكون رؤس الكونيديات القريبه تكون متصلة مع وحدات أخرى لتكون تجمع كويندى أكبر كما فى T . hamatum هذه الجراثيم تكون فى كريات وفى تحت كريات وتكون صغيرة ذات جدرناعمة عديمة اللون فى شكلها المفرد ولكن تكون بيضاء عند تجمعها فى صورة كتلة ويصل قطرها إلى 2.5-3.5 m فى وتظهر قاعدة الجرثومة فى شكل قلم ويمكن رؤيتها بسهولة من المنظر الجانبى.
2- Trichoderma polysporum
ويمكن التعرف عليه بالكونيديات البيضاء النقية والتى تنشر بشكل غير منتظم على سطح المستعمرة كما تنتج كونيديات دائرية ويمكن تميز الكونيديات لهذا النوع عن تلك المندمجة والتى تتميز تحت الميكروسكوب بالهيفات المستطيلة النقية . فى بعض العزلات فإن الهيفات تستطيل وتظهر خشنة وذات جدر وفى بعض الأحيان تكون مختزلة وقد تكون غائبة وفى الحالة الأخيرة تكون الأفرع السميكة الخصبة الجانبية متجزئة عن الأفرع الرئيسية للكونيديات والتى تحمل بواسطة phialides والفروق التقسيمية لهذه الهيفات المستطيلة سوف تناقش مع T.hamatum وجراثيم phialospores للـ T.polsporum تكون أهليجية وعديمة اللون وأبعادها 3.5 - 2m فى حين أن الحجم الإجمالى للجرثومة يتراوح بين 2.4 - 3.8m وحتى 1.8 - 2.2 m وتنتج محمولة على ذنيبات phialides الصغيرة والقصيرة والمزدحمة المغطاه والتى يكون حجمها 4 - 6.5 m طول × 2.9 - 3.7m قطر .
ويكثر تواجد T. polysporum فى التربة وبقايا الخضراوات ويبدو أنها تنشر على مستوى العالم ولقد درست فى مراكز تجميع بريطانية وهو لندا وأمريكا وألمانيا وإستراليا وبالرغم من عدم وجود فروق كبيرة بين هذه الأنواع فإنها كانت تدرس على أنها أجناس مختلفة كما أشار Hughes ( 1958 ) كما فى T . hamatum اما العالم Boinier (1956) لم يعطى وصف للنوع الذى قدمة. ومنذ ذلك الحين لم يظهر وصف أخر لهذه الأنواع إلا أنة لا شك فيه أن Boinier كان يتعامل مع T. polysporum وبهذا الصدد يجب ملاحظة أن موطن المستعمرة الفطرية على T.hamatum لا تكون فى مكان محدد لهذا النوع حيث لاحظ نموها على أجزاء من فطريات أكبر .
ومن المقبول أن عزلات التربة المسجلة بإسم العديد من المؤلفين مثل T. album Preass ( (1851) كان ينطبق عليها صفات T. polysporum والطراز T.album فى حالة ما إذا كان موجوداً – لم يعاد دراسته أو وصفة لذلك فإنه غير معروف ولقد وصفها Preuss (1851) على أنها لها كونيديات كروية منتجة من مستعمرات بيضاء مغطاه بحواجز شعيرية. ولقد تفضل Dr. S.J. Hughes وأخبرنى أن عديد من مراكز التجميع تشير الى T. album على أنها T. polysporum كما أكتشف ذلك ايضاً فى سلالات أرسلها علماء فطريات Selketov - Isoboeua ( 1962 ) ولكن كانت تشير إلى أنواع أخرى نظراً لأن مستعمراتها البيضاء أعطت عناقيد صفراء وخضراء مصفرة .
ولقد كان Bisby ( 1939 ) محقاً عندما أكد أن وصف Date ( 1912 ) لـ T. album أن هذا الفطر لم يكن Trichoderma على الإطلاق وملخص وصفها مستعمرات تكون كتلة بيضاء على شكل بودرة تظل بيضاء وتصبح كريمى فى المزارع القديمة والجراثيم قد تكون مثلثة وتتصل من نهايتها بالكونيديات كما أن الجراثيم كانت alavriospores مما يؤكد أن هذا الفطر ليس Trichoderma .
فالجراثيم الكروية لفطر Constantinella tilleti كما وصفها – Nannfeldt & Eriksson (1952 ) Mason & Hughes .والتى وصفها Hugues(1958) والتى كانت جراثيم للفطر Botrytis terres كانت تشبة T.polysporum كونيديات كلاً النوعين ذات هيفات مستطيلة تحمل تاج يشبة الفلاسك وهو عضو إنتاج الكونيديات والذى يعطى كونيديات عديمة اللون لذلك فليس من العجيب أن Grove ( 1936 ) , lindou ( 1907 ) , Oudemons ( 1886 ) فسمو الأنواع السابقة على أنها pachybosium والشكل الذى إستخدمة Barnett(1960) لشرح هذا الجنس قد اخذ من Grove(1936) الذى شرح Pachybasium tilletie وكونديات الأنواع الأخيرة تكون raduol spores وتنتج بشكل غير متماثل مع الجراثيم الكويندية للنوع T. polysporum ومن الملاحظ أن كلا النوعين لا يمتان بصلة لبعضهما . ومن الممكن على أى حال أن يكون الوصف الأصلى ل ( 1851 ) T. Album كان على أساس ما جمع عن Constontinella tilletei .
والوصف الذى تلى ذلك كان على أساس بيئة العزل من حبوب القمح فى مستعمرات المزارع النامية بشكل بطئ أو سريع نوعاً وتغطى سطح البيئة بغزل ناعم السطح من خيوط الميسيليوم ذات الشكل الأبيض المائى . وتتكون الهيفات الهوائية فقط فى المزارع القديمة ذات لون ابيض يعكس لون المزرعة الذى يظل دون تغيير .وتكون الهيفات مجزاء شفافة ذات جدر ناعمة يصل قطرها الى 1.8 - 1 m تكون جراثيم كروية اواهليجية ولكن بشكل غيرمنتظم قد تكون داخليةاو طرفية على هيفات قصيرة تكون شفافه ناعمة يصل قطرها الى 8.5 m .
وتظهر الحوامل الكونيدية غير منتظمة ولكنها متجمعه مع بعضها على سطح البيئة وتكون خصلات مندمجة متبعثرة. وتكون الحوامل الكونيدية ذات أفرع تصل له 6.3 m فى القطر . ويكون لها قمة دائرية فى حين يحمل الجزء السفلى أفرع جانبية خصبة حيث يزداد طولها كلما بعدت عن فمة الفرع الرئيسى ويكون الفرع الطرفى النهائى أطول من ذلك الذى أسفله . وتظهر هذه الأفرع الجانبية الخصبة فى أزواج وأحيان فردية أو فى مجاميع ثلاثية وفيما عدا الفرع الطرفى فإن كل فرع جانبى يكون عليه أفرع جانبية أصغر وهكذا . وينتهى كل طرف ب phialide لأن قمة الكونيديا تنفتح ويتضاعف قطرها حتى يصل إلى حجم phialide فى المرحلة الأخيرة تستطيل الهيفات الفردية للأفرع الرئيسية للحامل الكويندى وتظهر بعد ىقطر يصل إلى 1.5 m فى قمته وتظهر مغطاه بشعيرات أما تشبه الأسواط وقد تكون متصلة ببعضها .
وقد يظهر فرع خصب أو إثنين على الزاوية اليمنى للحامل ويلاحظ أيضاً أن الأفرع الخصبة الطرفية قد يكون بها هيفات مستطيلة أخرى . كما فى باقى الحوامل الكويندية تظهر هيفات قصيرة أخرى مقسمة وشفافة وذات جدر ناعمة وعند فحصها على أطباق بترى بإستخدام الميكروسكوب نجد أنها خشنه الجدرنتيجة وجود بعض الحيببات وتكون ذنيبات phialides قصيرة 3.5 m) × (4 - 6.5 وتشبه الكمثرى وتكون عريضة من الوسط عن القاعدة ومستدقة الطرف ذات عنق قصير مخروطى . وتكون قائمة فى الزواية اليمنى للأفرع الخصبة التى تنتجها وتظهر فى مجموعات حتى خمسة وذلك فى الأفرع المنتفخة . فهذا الترتيب الشبيه المغزل للذنيبات phialide شائعة الظهور فى الأفرع الخصبة.
وتتنج جراثيمها phiolidospores بشكل متتالى ومفرد من القمة وتلتف لتكون رأس كويندى متفق وقد تلتحم هذا الرأس الكويندية مع أخرى ناتجة من phiolide جانبى . وتكون الجراثيم عديمة اللون ولكنها بيضاء اللون عند تجمعها مع بعضها فى كتل وتكون أهليجية ذات جدر ناعمة إلى مستطيلة ذات زوايا يصل حجمها إلى 1.8 - 2m ×2.8 - 3.7
3 - Trichoderma hamatum
مثل الأنواع السابقة فإن Trichodrma hamatum شائعة الإنتشار فى مراكز بريطانيا و أيرلندا وألمانيا وسويسرا والهند وأندونسيا وإستراليا ونيوزيلاندا وأمريكا ولم أكن قادراً على دراسة نموذج Verticilium hamatum وإستخدام هذا الإسم كإسم للنوع الحالى وأدركت بشكل كبير أن الوصف الأصلى الذى أطلقةBonorden (1851) .
حيث يوجد العديد من سلالات Trichoderma والتى تتفق مع الوصف السابق كلها لها نفس الوصف باختلافات بسيطة لـ T. polysporum فيما عدا النوع الحالى فإنه يوجد خلافات سواء ميكرسكوبية أو غير ميكرسكوبية لتلك الأنواع . ومنها أنواع عديدة أدرجها هنا وبالرغم من دراسة 150 عزلة فإن 4 أو 5 منها تمثل Trichoderma ومدرجة ضمن أنواع مختلفة من Hypocrea الست وحيث أنه تم فحص نماذج كافية من T. hamatum وعند المحاولة لإستنباط نظم لتصنيف جنس T. hamatum فإنه مما لا شك فيه أن هذه الأنواع المتباينة سوف تتجمع فى مجاميع أصغر.
ويمكن تعريف T. hamatum من الأنواع الأخرى ذات الجراثيم الخضراء بخصائصها التالية المكان الخاص بالكونيديا الأولية تتألف من حوامل كويندية متباينة مندمجة وعند فحصها عن قرب يمكن رؤية الكونديات طويلة وسميكة وقد تنتهى بإستطالة تشبة تلك الموجودة فى T. polysporum والجزء السفلى من الحامل الكويندى يكون عليه أفرع جانبية خصبة سميكة وقصيرة ومغطاه بتاج قصير يشبة القارورة تعطى جراثيم أهليجية ذات جدر ناعمة غالباً أطول من 4 - 5 m .
وأول فرق ملحوظ فى عزلات T. hamatum يلاحظ فى شكل وحجم جراثيمها phaolospores فجراثيم Trichoderma من نيوزيلاندا والتابع للنوع Hypocrea semiorbis يكون جراثيمها ذات الحجم 2.2 - 2.8 ( -3 ) M × 3.8 - 5.2 ( - 6 ) تكون مشابهة بشكل أو بأخر للجراثيم المتحصل عليها من هذه العزلات مجتمعه وجراثيم PHIALOSPORES المنتجة بسلالات معزولة من الصفصاف أو حطب القطن أو اراضى سهول الغابات بالولايات المتحدة الأمريكية نفيس فى أبعادها 1.7 - 2 M × 2 + 3.1 شكل 9B حيث أن عزلات الجراثيم الاسكية فى الأنواع غير المسماه من Hypocrea تغطى جراثيم Phialospores وتكون أبعادها 3 - 4 M × 5 - 9 بالرغم من أن هذا المدى من المقاييس للجراثيم تكون متشابهة نوعاً وتوجد أنواع عديدة من العزلات والتى لها أحجام متوسطة من الجراثيم كما أشار Tochinoi & Shimoda ( 1931 ) حيث أن جراثيم phialospores pachybasium bulbicolo Tochinai تصل إلى 1.8 - 3 m × 2.5 - 4.5 بينما العزلات من القمح وجد انها ذات أبعاد 2.2 - 3 m × 3.5 - 6.5 ( -8 ) .
وإعتماداً على العزلات فإن شكل T. hamatum , phiolospores تختلف من بيضى شبه إسطوانى فالجراثيم لهذه العزلات تكون إسطوانية أو مستطيلة ومن المنظر الجانبى قد تبدو ذات زوايا شكل 6d وعلى العكس فإن TOCHINAI , SHIMADA ( 1931 ) وصف الجراثيم و P. BULBICOLA ذات شكل بيضى وتشبة تلك .
4- Trichoderma Koningii
أخذت 6 عينات تربة من موطن T. koningii وإحتوت العينات على T. veride , T. polysporum وقد إحتوى أربعة عينات من التربة على مستعمرات لل Trichoderma ذات الصفات التالية :- خضراء باهته اللون تكون خصلات مفككة أو قليلة الإندماج من الكونديات والأفرع الطرفية تكون إسطوانية شجرية منتظمة تنتهى ب phialides كما يتواجد أسفلها 2- 5 phialides كاذبة تعطى جراثيم أهليجية قصيرة إلى إسطوانية ذات جدر ناعمة وأبعادها 2.8 m × 1.9× 3 - 1.8 ومن الصعب التأكد من أن هذه الأفرع السابقة متماثلة أم لا مع الوصف الذى قدمه T.koningii , (1902 ) Oudemans وعلى كل حال فإن هناك بعض الأغراض على إستخدام الإسم التقليدى على عزلات متشابهة لتلك السلالات والتى تبدو قريبة الشبة لما قدمه oudemons
ومن المعروف أن Gilman & Abbott ( 1926 ) , Abbott ( 1927 ) Boinier ( 1956) وأخرين أطلقوا إسم T. koningii على الأنواع الحالية فى بعض الأحيان يدرج T. hamatum هنا بواسطة الباحثين الروس . وتبدو مختلفة نوعاً فى بعض Trichaderma حيث يكون لها وصف ميكرسكوبى مختلف عن الوصف الحالى ولقد إعتمدت هنا فى وصفها على تربة من هولندا ( غابات ) على بعد 10كم من Been سنة 1964 .
تنمو المستعمرات بسرعة فى حرارة الغرفة وفى البداية تكون ناعمة السطح ولكن تكوين الهيفا فى المراحل الأخيرة يظهرها شعيرية خصوصاً عند حواف طبق بترى ويتدرج اللون من الأبيض المائى إلى الأبيض وتكوين جراثيم الـ phialides يظهرها بلون أبيض مخضر ثم أخضر مبيض أخضر باهت إلى غامق ولا يحدث إختزال للون البنىة ويكون المسليوم زجاجى ناعم ومجزأ بجدر ذات قطر 2 - 10 m والجراثيم الكلاميدية تتكون بشكل مثالى على حافة الهيفا . وتكون كروية أو أهليجية وأحياناً كمثرية الشكل ذات جدر ناعمه ويصل قطرها إلى 12m وتكون الحوامل الكويندية متفرعة تتكون فى صورة شعيرات مفككه أو مندمجة فى شكل منطقة حلقية . وقد تتفكك هذه المنطقة عند النضج نظراً لتكون الحوامل الكويندية مع الهيفات الهوائية أو الأرضية والتى تمتد خارج منطقة الكونديات الأساسية .
الأفرع الرئيسية للحوامل الكويندية والتى يكون قطرها 4 M يظهر عليها مجاميع من الأفرع الجانبية من 2 – 3 وتكون مكونة زاوية على الجانب .وطول الأفرع الجانبية يزداد بشكل ملحوظ بالبعد من محور الفرع الرئيسى لذلك يبدوالشكل مخروطى أو هرمى . تتكون أفرع جانبية أصغر على الأفرع الجانبية . وتكون PHIALIDES قريبة تشبه ب NINE - PEN - SHEPED أكثر ضيقاً فى القاعدة عن الطرف ويصل أبعادها إلى 2.5 - 3.5 M × (5- ) 75 - 12 وقد تصل الأفرع على الكوينديا الرئيسية إلى 30 M وتكون عادية مع الحامل الرئيسى وقد تكون منتظمة نوعاً وتكون الجراثيم PHIOLOSPORES إسطرانية إلى أهليجية ذات زاوية وقد تكون بيضة قاعدة عريضة وقمة مستديرة ابعادها 1.9 - 2.8 M × 3 - 4.8 ذات جدر ناعمة وخضراء باهته إلى خضراء عندما تكون مفرد تحت الميكرسكوب أما وهى متجمعه فتبدو غامق وتنتج هذه الجراثيم بشكل مفرد وبالتتابع وتتجمع فى شكل كونيديا كروية فى قمة كل PHIALIDE ولا تختلف هذه التجمعات عن غيرها من TRICHODERMA .
5- Trichoderma aureoviride
تتكون من مجاميع ذات شكل بيضى وجدر ناعمه وجراثيم خضراء تتراوح طولها من 2 - 3 .2 M × 2.6 - 5 وتنتجها phioldes ويوجد العديد من العزلات ذات الصفات المشابهة ميكرسكوببياً والتى قد تختلف فى عدم وجود التلوين للمستعمرات والتى قد يكون ذهبى أو شكل حبيبات أبرية على سطح البنية علاوة على ذلك فإن قوام الخصلات للحوامل الكويندية والتكوين ومعدل النمو للمستعمرات تختلف عن عزلات النوع T. aueovirdie .
والعزلة من النوع SHD-M 2663 تكون جراثيم أسكية فردية ل hypocrea oureoviridis والتى وصفت وصفاً تلماً بواسطة Rifai - webster عام 1966 ولقد بين أم هذه العزلة لها معدل نمو بطئ جداً بالمقارنة بالعزلات الأخرى للنوع trichodereovirdie بما فى ذلك hypocrea vinosa والتى صنفت هنا على أساس أنها أحد أفراد T. aureovirdie والمستعمرات الناجحة ل Trichoderma والخاصة بـ H. vinosa تظهر بلون أخضر مصفر ثم أخضر زيتونى ثم تتحول إلى اصفر مخضر شاحب وتكون الحوامل الكويندية خصلات مفككة وعديد من الكونديات البسيطة والتى تبدو كأفرع جانبية هوائية أو زاحفة خارج منطقة الكونيديا الرئيسية .
وتكون PHIALIEDES أقصر قليلاً من shd - m 2663 حيث تكون 2.5 – 3.5 × 6 - 10 ( -14 )ذات شكل زجاجة ولكن تبدو غير متماثلة من الناحية الجانبية حيث تنثنى قليلاً تجاه القمة للحامل وحوامل الجراثيم الخضراء تكون ناعمة الجدر تماماً بيضة أو أهليجية أحياناً ذات قاعدة عريضة 2.5 - 3.2 m × 3.5 - 5 ومن الناحية الميكرسكوبية فإن العديد من العزلات من التربة تبدو تتشابه كثيراً ل Trichodermaمن H.hvinosa عن H. aureovirdis ولهذا فإن الأخير يعتبر أساس الأنواع . ولكن لم أرى إلا نوع واحد من H. hvinosa لذا فإنها غير مفهومة تماماً فى مقابل 20 عزلة من H. aureovirdis تم فحصها أيضاً صعوبة فصل العزلات لهذه الأنواع يمثل قيداً أخر .
ومن المقبول أن عزلات T. aureovirde ذات لون مستعمرات الخضراء المصفرة أشير إليها على أنها ( 1926 Abbott ) T. glaucum إلا أن هذا يظل محل شك علاوة على ذلك فإن أى من العزلات النابعة ل T. aureovirde التى أختبرت لا ينطبق عليها الوصف الأصلى ل Abbott وتقابل أى محاولة لتعريف عزلاً T. glaucum صعوبات عدة على إعتبار أن الحقائق المعروفة منها تتعلق باللون الخاص بالمستعمرة والتى لا تكون ثابته فى حين أن Abbot قد أعطى وصف للشكل والحجم والذى يؤكد إقتراح أن هذا النوع لا علاقة له بالنوع الحالى ولكنه له صلة ب T. virde ويلفت الإنتباه هنا قوام المزرعة لمختلف الفطريات النامية على czapek agar وإحداها هو Trichodderma والتى تنمو على بادرات quereus هذه العزلة والتى تعد T. viride والتى تتفق نوعا مع وصف T. Glaucum , Abbott 1926 من ناحية إحتوائها على كونيديات خضراء وصفراء وخضراء وصفرة وكذلك حوامل الجراثيم الكوندية تحت الميكرسكوب فإن ترتيب phialies لهذا الأخير لا تختلف عما شرحة Abbot فيما عدا أن بعض الجراثيم صفراء إلى خضراء مصفرة تكون ناعمة الجدر وقد يظهر بعضها بشكل مختلف تماماً عند فحصها بالعدسات المغمورة فى الزيت ( fig 12 ) وعليه فإن مزرعة من هذه العزلة ممساه على بينة مستخلص المولت 2% ( والتى فقدت لسوء الحظ ) أعطت مستعمرات مشابهة T. viride ولقد وصف T. aureoviride Rifai & Webster ( 1966 ) كالأتى :
تنبت الجراثيم على بينة مستخلص المولت 2% وتكون مستعمرات تنمو ببطئ شديد فى حرارة الغرفة تكون ذات سطح ناعم أو مائى ذات ميسليوم أبيض وقليل من الهيفات الهوائية ونتيجة لهذا التزامن فى تكوين شعيرات حوامل الكونيديات تكون مساحة الكونيديات بيضاء فى البداية ثم تصبح فى مركزها بيضاء ومخضرة ثم فى النهاية تتحول إلى خضراء بلون الحشيش الاخضر. أحياناً ما تحيط الحوامل الكونيدية بالشعيرات ولذلك قد تبدو بحواف بيضاء وعند النضج تصبح المستعمرة ملونة بلون أصفر إلى أصفر بنى وهذا التلوين يكون نتيجة وجود حبيبات بشكل ابرى ذهبى مصفر . وتكون الهيفات شبكات مندمجة وتتكون من جدر ناعمة متفرعة ذات حواجز وهيفات عديمة اللون قطرها 1.5 - 8m وتحتوى على حبيبات زيتية وتظهر الجراثيم الكلاميدية على الحواف أو تكون خصلات زاحفة وتكون كروية وذات جدر ناعمة وقد تصل فى القطر الى 10 ميكرون والحوامل الكونيدية فتتوزع على سطح المزرعة. فيما بعد تظهر حوامل كونيدية بسيطة من الهيفات الهوائية أو من الكونيديات البدائية والأفرع الرئيسية للحوامل الكونيدية تكون إسطوانية قطرها حوال 4m وتظهر الحواجز العرضية أسفل الأفرع فى مجاميع ثنائية أو ثلاثية وبالتالى تكون الأفرع الجانبية أفرع أخرى جانبية أصغر وهكذا ويزداد طول الأفرع الجانبية ببعدها على عن قمة الفرع الرئيسى فيما عدا النوع الحالى تكون الأفرع أكثر تفاديا ومنظمة الشكل من النوع الأخر ) وتميل جميع الأفرع له حاملها وينتهى كل منها بذنيب phialide والذى يكون طويل وإسطوانى 2 - 2.5m × 7.14 ( -18 ) ويشبه القرن أو على شكل زجاجة غير منتظمة الاشكل يكون قاعدتها أضيق من وسطها وتظهر فى مجاميع ثنائية أو ثلاثية أو أكثر قليلاً مكونة حلقة كاذبة اسفل طرف ال phiolide وتكون واقفة تجاه الزاوية الكبيرة على حاملها وقد تنثنى تجاه قمة المحور والجراثيم phiolspores ذات جدر ناعمة بضة ذات قاعدة عريضة وأحياناً بيضة أهليجية وأبعادها 2 - 3 m × 3 - 4.3 وتنتج بالتتابع وتتجمع لتكون رأس كويندى كروى فى قمة كل phiolide تحت الميكرسكوب تظهر جراثيمها بلون خضراء مصغرة عندما تكون صغيرة فإنها تحتوى على قطرات زيت والتى تختفى عند النضج .
6 - Trichoderma harz ianum
يوجد العديد من عزلات التربة من Trichadrmo والتى تحتوى على جراثيم phialospores كروية صغيرة كروية أو بيضة وناعمة الجدر والتى تنتج من phialides قصيرة مرتبة كما فى T. koningii الجراثيم phialospores الكروية لهذا النوع تشبه T. lignorum أو T. viride كما اشاد علماء الفطريات وخصوصاً الروس والذين لم يقبلوا تصنيف Bisby للـ Trichodermo طبقاً لما إستخدمه Seiketov وأعوانه فقد أطلقوا أسم T. lignorum على العزلة ذات الجراثيم phialaspores ناعمل الجدر والتى يصل قطرها 2.5 - 3.75 m حيث أن العزلات ذات الجراثيم خشنة الجدر أطلق عليها T. lignorum ( tode) ex harz vor . norcisst ولقد وصف Abbot عام 1926 جراثيم phiolospore على ما أطلق عليه T. lignorum كالأتى :
جراثيم كروية ناعمة الجدر أو بيضة قطرها 2.8 - 3.2 m وقد أعطى coilman عام 1957 وصفاً مشابهاً ومن المهم ملاحظة أن وصفة كان مشابهاً للنوع الحالى من نظام التفريـع للكونديـات ومواضـع الـphiolide . وعلى أى حال فإنه لا داعى لإستخدام إسم I . lignorum للنوع الحالى أو الذى نوع أخر من أنواع Trichoderma ولقد وصفها har3 uhl 1871 كالأتى :-
فإقتراح tode ل t. lignorum ب pyrenium lignorum x. vulgare واسم النو عrwgres وتسمية ha3لانواعة النامية على الأفرع الساقطة ومواد أخرى خلال العام أعطى شكوكاً أن har3 و tode كانا يتعاملان مع النوع المشهور t. viride حيث لم يكن مقبولاً أن كل الأنواع الخضراء لل trichoderma والنامية على الخشب والمواد الأخرى هى I. Viride وحجم الجراثيم تبعاد har3 صغيرة جداً ( 0.0026 nm = 2.6 m ) بالنسبة للعزلات المعروفة من I. Viride ولكن يهمل هذا الإختلاف جداً نظراً لإختلاف معايرة الميكرسكوبات فى ذلك الحين عن الأن . ولم يشد har 3 إلى وجود ما يدل على تواجد علامات على جدر جراثيم phiolospores وقد يكون ذلك لأن ميكرسكوبه ليس به القوة الكافية لكشف هذه العلاقات وفى الواقع أن هذه العلامات على الجدار فى T. Viride قد اكتشفت منذ 40 سنة مضت بواسطة DALE عام 1914 على أنها T. Lignorum .
ولسوء الحظ فإنه بعد موت tode لم يتواجد عينات له من T. Lignorum حيث حطمت بعد موته بفترة قصيرة ( mason - ellis , 1953 ) ولم يشر harz فوجود أى علامات للجراثيم على جدار ال phialospores ربما لأن الميكرسكوب ليس له قوة تكبير كافية للكشف عن هذه العلامات والحقيقة أن أول دلالة لجدار الجراثيم الخشن لـ T. viride كان فى 40 عاماً الأخيرة بواسطة Dale عام 1914 فى T. Lignorum ولسوء الحظ فإنه يبدو أنه لا يوجد نموذج ل i. Lignorum وبعد موت tode لفترة قصيرة تحطمت عيناته .
كما هو معروف فإن i. Viride قدمت بإسم vulgare , pyrenium lignorum وهذان الإسمان مترادفان وأول من أشار إلى ذلك هو ( 1821 ) gary وقبلها fries عام ( 1829 ) كما أشار إلى ذلك ايضاً Persoon وتحت الإسم المتعارف عليه بنظام النسبية الثنائية T. Lignorum الذى أرفه Tode . har عام 1871 وقد إستبدل هذا الإسم ب T. viride بواسطة بعض العلماء مثل Dennis 1960 , Gilman 1957 , Kamyshke 1961 ولا يمكن إستخدام T. Lignorum للأنواع الحالية من الجاثيم الناعمة ( الملساء ) كمكا أشار إلى ذلك pidoplichko عام 1953 وتابعيته ولتجنب هذه التداخلات فإنه سوف يشار إليها ب T. Harzianum .
وتختلف عن T. viride فى اشياء كثيرة مثل غياب زخرفة الجراثيم وصغر حجمها phialides , المزخرفة وإنتظام التفريع للكونديات والتلوين وبالتالى لن يكون هناك صعوبة فى تمييزها . وعلى كل عزلات قليلة قد تحدث تداخلات بينها . ولها خصلات ومستعمخرات خضراء غامقة كما فى T. viride ولها نفس نكهة جوز اله9ند لهذا كما أنها لها نفس حجم وشكل وتوزيع phialides الموجود فى T. viride فيما عدا أن جراثيمها الكروية ناعمة الجدر جداً لهذا السبب فإن هذه العزلات يجب أن تكون نصنفة بالغرب من T. viride ولكن حتى يتم التعرف اكثر على خصائصا فإنها تصنف بشكل منفصل .
وقد يكون من الصعوبة التعرف على عزلات T. harzianum من عزلات T. auroviride حيث يكون phialids ل T. harzianum أقصر من T. aureoviride فى جدر 2.5 - 3.5 × 4.5 - 8 ( - 18 ) و 2 - 3.5 m× 5 - 12 ( - 18 ) على التوالى :
والأنواع السابقة يمكنها تكوين جراثيم بيضة قصيرة بنسبة طول فى عرض أقل من 1.25 وقد تتحول مستعمراتT. aureoviride إلى عديمة اللون وقد يحدث ذلك فى مستعمرات قليلة من T. harzianum ومع كل فإنT. aureoviride تنتج بللورات ملونة .
وتتواجد فروق ميكرسكوبية فى مظهر المستعمرات للعزلات . ويختلف اللون للمستعمرات من أخضر مبيض إلى أخضر باهت أو أخضر مصفر وتكون حلقة مثل نطقة الكونديات والتى تتكون من شعيرات مفككة من الحوامل الكويندية وهذه الشعيرات قد تكون مندمجة فى بعض العزلات أو مفككة جداً ويبدو سطح المزرعة كما لو أنه قضى وخصائصها الميكرسكوبية لا تظهر أى خلافات وجراثيمها تتراوح بين 2.2 - 2.8 ( -3 ) m ×2.4 - 3.2 ( - 3.5 ) بمتوسط 2.7 m × 3 .
والوصف التالى لعينة T. harzianum معزولة من تربة فى إنجلترا عام 1963 حيث تنمو المستعمرات سريعاً وتكون فى البداية ذات سطح ناعم أبيض مائى وتنشر كتلة المسيليوم حيث تنمو الهيفات الهوائية على سطحها وتكون الكونيديات خضراء مبيضة تتحول إلى أخضر لامع ثم أخضر شاحب . ويظل الباقى من المستعمرة غير ملون . وتكون الهيفات مقسمةذ ومتفرقة وناعمة الجدر عديمة اللون ذات قطر من 1.5 - 12m وتكون الكونيديات مفككة وتكون ما يشبه الحلقة فيما بعد تتكون كونيديات أقل إندماجاً خارج المساحة الكونيدية فى نطاق أو خارج نطاق سطح المستعمرة الأفرع الرئيسية للكونيديات والتى يصل قطرها 4.5 m تنتج عديد من الأفرع الجانبية . قد تكون هذه الأفرع فردية ولكن فى الغالب تتكون فى مجاميع من 2 – 3 وأغليها وخصوصاً السفلية منها تنتج أفرع جانبية أصغر وهذه بالتالى تحمل أفرع وتخرج هذه الأفرع على الزاوية اليمنى للحامل ويزداد طولها كلما بعدت عن القمة وتكون أقل إنتظاماً فى التفريع ذات شكل مخروطى أو هرمى وعموماً فإن الحوامل الكويندية تشبه مثيلتها فى T. kningii تظهر لل phialides النهائية فى محاور كاذبة تصل إلى خمسة وتكون أسفل phialides التى تتفرع طرفياً وتزيل كل الحوامل الكويندية وعلى كل فإنه يمكن أن يظهر بشكل فردى وغير منتظم على إمتداد أفرع جانبية أصغر وتكون أقصر وذات شكل skittle وأضيق فى القاعدة عنها فى المنتصف وتتجه إلى الشكل المخروطى وعنق مستدق تصل إلى 3.5 m × 5.7 والـ phialides المثلى تكون أطول من ذلك وذات شكل إسطوانى وتصل إلى 2.5 m × 180 وغالباً 8 -
والوصف التالى لعينة T. Harzionum معزولة من تربة فى إنجلترا عام 1963 حيث تنمو المستعمرات سريعا وتكون فى البداية ذات سطح ناعم أبيض مائى وتنشر كتلة المسيليوم حيث تنمو الهيفات الهوائية على سطحها وتكون الكونديات خضراء مبيضة تتحول إلى أخضر لامع ثم أخضر شاحب . ويظل الباقى من المستعمرة غير ملون . وتكون الهيفات مقسمة ومتفرقة وناعمة الجدر عديمة اللون ذات قطر من 1.5 - 12m وتكون الكونديات مفككة وتكون ما يشبه الحلقة فيما بعد تتكون كونديات أقل إندماجاً خارج المساحة الكوندية فى نطاق أو خارج نطاق سطح المستعمرة الأفرع الرئيسية للكونديات والتى يصل قطرها 4.5 m تنتج عديد من الأفرع الجانبية . قد تكون هذه الأفرع فردية ولكن فى الغالب تكون تتكون فى مجاميع من 2 – 3 وأغليها وخصوصاً السفلية منها تنتج أفرع جانبية أصغر وهذه بالتالى تحمل أفرع وتخرج هذه الأفرع على الزاوية اليمنى للحامل ويزداد طولها كلما بعدت عن القمة وتكون أقل إنتظاماً فى التفريع ذات شكل مخروطى أو هرمى وعموماً فإن الحوامل الكويندية تشبه مثيلتها فى t. kningii تظهر لل phiolides النهائية فى محاور كاذبة تصل إلى خمسة وتكون أسفل phiolides التى تتفرع طرفياً وتزيل كل الحوامل الكويندية وعلى كل فإنه يمكن أن يظهر بشكل فردى وغير منتظم على إمتداد أفرع جانبية أصغر وتكون أقصر وذات شكل skittle وأضيق فى القاعدة عنها فى المنتصف وتتجه إلى الشكل المخروطى وعنق مستدق تصل إلى 3.5 m × 5.7 والـ phiolides المثلى تكون أطول من ذلك وذات شكل إسطوانى وتصل إلى 2.5 m × 180 وغالباً ما تكون ال phialade واقفة على الزاوية المتسعة لحاملها ولكن فى بعض الأحيان قد تنثنى تجاه القمة وتبدو متداخلة مع بعضها وتنتج جراثيمها مفردة وبشكل متتابع وتتجمع فى قمة ال phialide لتكون رأس كويندى كروى الجرثومة بمفردها ولكن فى حالة تواجدها فى كتل تكون أكثر عتامه وتصل أبعادها إلى 2.5 - 2.8 m × 2.8 - 3.2 بمتوسط 2.69 m × 2.97 .
7- Trichoderma longibrachiatum
هذه الأنواع أهم بها جداً نظراً لإحتوائها على 3 عزلات تحت الدراسة هذه الثلاث عزلات تتفق مع عزلة أخرى فى إحتوائها على الحوامل الكويندية ذات الأفرع الطويلة نسبياً هذه بدورها تعطى أفرع أقصر وإسطوانية وغير منتظمة والتى بدورها تعطى أفرع أصغر وفى الحقيقة فإن بإتجاه القمة للفرع الرئيسى فإنها تقصر حيث تحمل كل منها بما يسمى ب apical phialide وتظهر ال phialides مفردة وغير منتظمة حيث تمتد على طول الفرع الرئيسى حيث تنتشر عن بعضها البعض.
حيث يتواجد Cepholosporium النسبية بال phialide وجراثيم هذا النوع phialospores تكون ذات جدر ناعمه أهليجية أو بيضية إلى شبه إسطوانية حجمها متوسط إلى كبير بمتوسط عام 2.2 - 3.7 m × 3.5 - 7 .
أحد العزلات المقدمة هنا من ( T. longibrachiotum ) New zealand بواسطة السيدة J . M . Dingely وهى عبارة عن Trichoderma state of hypocrea schweinitzii وعديد من جراثيمها اللاسلكية من أمريكا الشمالية تكون أهليجية أو تشبة phialospores وهذه السلالة الأمريكية من ( h. schweinizii ) Trichoderma تشير إلى مجموعة الأنواع التالية.
وعلى العكس طرز المزرعة من T. longibrachiatum فإن المستعمرات المعزولة بواسطة Dingley ذات لون أخضر مصفر ذات شكل ليمونى والمنطقة الكويندية لا تكون خصلات محددة . وإلى الجانب الأخر عزلة أخرى
من T. longibrachiatum معزولة من ال compost كان لها مستعمرات خضراء زيتونية مع إمتداد أصفر وتكونت الحوامل الكويندية ولكن مفكك .
وتنمو المستعمرات بسرعة كبيرة وتكون فى البداية ناعمة شفافة أو مائية بيضاء ثم تصبح flouose خصوصاً تجاه حواف طبق بترى وقد تتكون خصلات من الحوامل الكويندية وتتغير ألوان منطقة الكونديات من أخضر مبيض إلى أخضر زيتونى فاتح فى حين يظل الوجه المعاكس للمستعمرة غير ملونه . ويتكون الميسليوم من حواجز عرضية كثيرة التفريع ذات جدر ناعمة ذات قطر من 2 – 10 m ويتكون العديد من الجراثيم الكلاميدية تكون بالقرب من الحواف وتكون كروية إلى أهليجية ناعمة الجدر تكون شفافة وتصل إلى 10m فى القطر وتكون الحوامل الكوندية متجمعه وتظهر فى منطقة دائرية وبنمو المزرعة وتقدمها فى العمر تتكون حوامل كويندية أقل إنجناباً فى منطقة واسعة ولكن على الأخص تجاه حواف طبق بترى كما يظهر حوامل كوندية مندمجة معها خارج منطقة الكونديات وقد تظهر خصلات الحوامل الكوندية المندمجة من أفرع رئبسية كويندية ثم تصبح هذه الخصلات pruinose ولا يمكن رؤية عناصر فردية فوق سطحها . ويصل قطر الفرع الرئيسى للحوامل الكوندية 5m وذات تركيب بسيط وطويل وتكون أفرع جانبية قليلة والتى تكون قصيرة وبالتالى تعطى أفرع جانبية أصغر وفيما عدا ذلك فإنه يظهر بالقرب من قاعدة الفرع الرئيسى وتقف كل هذه الأفرع عند الزاوية اليمنى لحاملها وتنتهى كل منها بـ phialide والـ phialide تتكون بشكل مفرد متبادل غير منتظم على إمتداد الفرع الرئيسى وتنفصل عن بعضها البعض وفى بعض الأحيان تبدو فى أزواج متضادة أو نادراً ما تكون فى مجموعات من ثلاثة اسفل ال phialide الطرفية.
فى بعض الأحيان فإن ال phialides التى تظهر على إمتداد الفرع الرئيسى لا ترتكز مباشرة على الأخير ولكن تنتهى بما يشبه القدم وقصير ويقبل الأفرع الجانبية وتكون ال PHIaLIDES [أبعاد 2.5 - 3 m × 6 - 14 على شكل الزجاجة ذات محيط إسطوانى أضيق قليلاً عند القاعدة عنه فى المنتصف وفى بعض الأحيان تنتهى تجاه المحور الكويندى الرئيسى أو فى إتجاه أخر وتكون الجراثيم رأس كونديات كروية فى قمة محدد كل phialide وذات أبعاد 2.2 - 3 m ×3.6 - 6.5 أهليجية أو تحت إسطوانية ذات قاعدة مخروطية مربعة وجدر ناعمة خضراء شاحبة عندما تكون منفردة ولكنها خضراء عندما تكون متجمعه وتكون محتوية على oil globules عندما تكون صغيرة ولكنها تصبح obscure عند النضج .
8 - Trichoderma pseudokoningii Rifai agar
والعزلة T. pseudokoningii والتى سوف توصف مفصلاً فيما بعد أختيرت من مزرعة ascospore للنوع الإسترالى ذات الجراثيم الخضراء hypocreo والذى يحتوى على حواجز خضراء وأنسجة خضراء ملونة أيضاً ولقد درست العديد من العزلات والتى قد يكون لها بينها إختلافات ميكرسكوبية ملحوظة من بلدان مختلفة والتى تخص النوع الحالى والمتشابهه ميكرسكوبياً .
والنوع i. من شمال أمريكا H. schweinitzii يختلف من T. pseudouoningii حيث يكون السابقة خصائص الكونديات ذات الخصلات المندمجة حيث تتكون الحوامل الكوندية بإستمرار على حواف هذه الخصلات حيث تتسع الأخيرة وتعطى منطقة رائقة . وعلى العكس فإن عزلة P.H.B. talbot - h1 لا تكون خصلات بشكل طبيعى وتبدو الحوامل الكوندية بشكل دائم ولكن رفيعة على سطح كل المستعمرة حيث تبدو الأخيرة رفيعة أو شعيرية . حيث لا توجد خلافات ميكرسكوبية ملحوظة بين Trichodermo لكلا النوعين من hypocrea والتى تضم كلاً من التغيرات فى مظهر المستعمرة ونظراً لوجود شكل مستعمرة وسطحى والمدرجة فى أحد الأنواع ولقد تحصلت على عزلة من Dr . M . christensen والتى تتوافق مع Tricheaderma للنوع H. schweinitzii من كل الوجوه.
وتختلف T. pseudokoningii عن T. longibrachiatum فى العديد من الأوجه حيث تكون الجراثيم phioliospores للسابق فى معظمها شبه إسطوانية أو مستطيلة وصغيرة عن الشكل الأصلى لـ phialospores لـ T. Longibachiotum والتى تكون بيضية إلى أهليجية phialides للأنواع الحالية ذات قاعدة أنبوبية أقل وغير مشققه الأبعاد نظام التفريع ل T. pseudokongii أكثر تفريعاً عن T. longibrochiotum ومهما يكن فإن كلا النوعين قريباً جداً نظراً لأن نظام ال phialides متشابه بشكل أو بأخر فيما عدا الأنواع الحاسبة فإن ال phialides تكون أكثر إزدحاماً وتتكون الأشواك الكاذبة ومن الناحية الشكلية فإن T. pseudokoningii يكون أكثر قرباً من T. koningii عن T. Longibrachiotum ويمكن بسهولة تمييز النوع T. koningii عن الأنواع الحالية حيث أن الحوامل الكويندية للسابق يكثر تكرارها وتكون منتظمة فى نظام التفريع ولا تنتج Cephalosporium الشبيهه ب Phialide علاوة على ذلك فإنها لا تبدو فى شكلها كما فى T. pseudokoningii وتنمو المستعمرات وتغطى سطح البيئة بالميسليوم الناعم الشفاف المنتشر وفقر شديد فى النموات الهوائية ويتراوح التغيرات فى الكونديات من أبيض وأبيض مخضر إلى أخضر براق وتفرز الصبغات فى البيئة ولذلك فقد تصبح المستعمرات مصفرة والميسليوم الذى يكون شبكة الهيفات يتكون من أفرع مقسمة ذات جدر ناعمة عديمة اللون قطرها من 1 - 10 m وتتكون الكلاميدوسبور فى البيئة وتكون كروية ناعمة الجدر زجاجية ذات قطر 6 - 10 m والحوامل الكوندية تكون فى خصلات مفككة وقد تبدو شعرية وهى صغيرة وعند النضج تبدو كالمسحوق . وحيث تتكون الحوامل الكويندية فى البداية فى منطقة قريبة تشبه الحلقة ولكن فيما بعد تصبح بعيدة حيث تنمو المزارع بوفرة منتجة كونديات بسيطة خارج منطقة الكونديات وتبدو أجزاء المستعمرة أو كلها ناعمة نسبياً. عديد من الأفرع الرئيسية والتى تكون طويلة نسبياً يصل قطرها 4 - 5 m تنتج بواسطة شعيرات الحوامل الكويندية هذه الأفرع الرئيسية تعطى أفرع جانبية والتى بدورها تعطى أفرع أصغر يحمل عليها ال phialide وتتكون الأفرع بشكل غير منتظم وتظهر مفردة أو فى ازواج متقابلة ونادراً جداً فى مجاميع متلاقية أغلب هذه الأفرع تقف جالسة على الزوايا اليمنى لحاملها وتنتهى أجزائها دائماً ب phialide أسفل الأفراد بها أفرع الحوامل الكونيدية يوجد أعداد اصغر من ال phialide فى شكل القرن الكاذب أغلبها فى أزواج متعاكسة ولكنها ايضاً تصل إلى أربعة ولكن غالباً تظهر ال phialide بشكل مفرد على إمتداد كل الأفرع للكونديات بشكل متبادل أو غير منتظم نوعاً وترى هذه ال phialide فى الجزء الطرفى للأفرع الرئيسية . والأفرع الجانبية القصيرة للحوامل الكوندية يلاحظ وجودها ولا تنتج ال phialide فيما عدا عند طرفها وعموماً فإن phialide تكون شبيه ب skitlle أو الدبوسى ذو التسعة رؤؤس وتكون أكثر ضيقاً فى القاعدة من المنتصف ولكن أحياناً لذلك قد تشبه المغزل وأبعادها 2.7 - 3.5 m × 5.5 - 8 ولكن قد تكون هذه الأطراف أطول قليلاً وتصل إلى 13m والجراثيم phaliospores وتنتج فردياً وبشكل متتابع وتتجمع فى رؤوس كويندية كروية فى ثلاثة كل phialide وتكون قصيرة شبه إسطوانية وذات زاوية بشكل ما أو أحياناً أهليجية وعادة دائرية وذات قاعدة مخروطة ويكون لونها أخضر فى كتل وذات لون جاهت عندما تكون مفردة ذات جدر ناعمة وتصل إلى 2 - 2.5 m × 3.4 - 4.6 فى كل جراثيم T. pseudokoningii والتى تشبه T. koningii .
9 - Trichoderma viride pers ex s . f Gray agar
أشار Webster ( 1964 ) إلى أنه بجانب التوافق فى الصفات فى نموذج T. viride فأحد أوجه الخصائص لـ Trichoderma ل Hypocrea rufa تكون ثابته ومتجانسة نوعاً لذلك لا يكون هناك صعوبة فى التعرف على هذه الأنواع بخصائص الجراثيم الخشنه الجدر وخلال هذه الدراسة وجد أن خشونة ال phialospores ل Trichoderma ل H. rufa تكون على علاقة بالخصائص الأخرى لهذه الأسباب فإن T. viride المعنية هنا أسس على أعتبارها Trichodermo ل H. rufa حيث أن نمط ومدى التغيير فى هذه الأنواع معروف بشكل أو بأخر حيث إستخدمت ال Triclodema فى الصفحات السابقة كنموذج للعمل ومن المعروض التالى فإن العزلات المختلفة لل Trichoderma ل H. rufa تتغير فى شكلها وحجمها ولونها وقوامها المستعمرات ووجود أو غياب الصفات فى البيئة وهكذا وبالتالى فإن التغيير فى هذه الصفات أعتبرة لخلافات تقسيمية ممثلة للأنواع حيث توقع كأساسيات للصفات .
والصفة التى ميزت T. viride هنا والتى صنفها Webstea ( 1964 ) يمكن إيجادها فى جراثيمها ال Phialospores والتى عند إحتجازها بواسطة العدسة المغمورة فى الزيت تظهر واضحة خشنة الجدر . أغلب هذه ال phialospores تكون شبه كروية أو قصيرة بيضية ( كما فى الجراثيم الاسكية ل H. rufa من على Pinus sylvestris ) ويكون قطرها 2.8 - 4.5 m فى حين أن العزلات الأخرى لهذه الأنواع تكون جراثيمها بيضية أو أهليجية مفلطحة وفى بعض الأحيان تكون شبة إسطوانية قصيرة وتصل إلى 5m أو أكثر قليلا كما هو مشاهد فى العزلة المعزولة من حقل القرح بألمانيا عام 1963 ( fig 17 ) ولقد وضع Webster جدولاً وضح فيه التغيرات فى حجم جراثيم phialospores والتى يكون مداها 2.8 - 4.5 m × 2.8 - 5 ( - 6.3 ) جدى طبيعى حوالى 3 - 3.5 m × 3 - 4.5 .
وتحت الظروف الطبيعية فإن شكل ووضع ال phialides وكذا نظام التفريع للحوامل الكويندية T. viride يكون ثابت ومتجانس ومميز لهذه الأنواع . وتظهر الـ phialids فى قرون أو غير منتظمة . غالباً أقل من أربع phialides فى كل قرن وكل phialide منفصل تماماً عن المجاور له فى كل قرن ومن ثم تكون مزدحمة أبداً . ونظراً لهذه الصفات كلها بوضع نظام للتصنيف لهذا الجنس Trichadema على اساس وضع ال phialides ونظام التفريع للحوامل الكويندية ولقد عزل نظام التقسيم هذا للأنواع الحالة مع T. piluliferum .
والخصلات للحوامل الكويندية المتكونة بواسطة T. viride تكون مندمجة نوعاً وتظهر فى شكل منطقة كويندية دائرية ولكن هذه المناطق تصبح أقل وضوحاً بتقدم المستعمرة فى العمر وأحياناً فإن خصلات الحوامل الكويندية تكون مفككة وموزعة على سطح المستعمرة ولذلك تصبح ناعمة ( مثل القطيفة ) وعلى أى حال فإنه لا يوجد علامة واضحة ترتبط بهذه المظهر القطيفى والمستعمرات الناضجة لـ T. viride ذات لون أخضر داكن أو أسود مخضر مميز بعض المستعمرات قد يكون لها لون أخضر مصفر ولكن هذا ليس ثابتاً صفة مقبولة حيث أنه الملاحظ فى عزلات الجراثيم الاسكية shd.m 2611 والتى حفظت فى الضوء المستمر على 15م هذا بالإضافة إلى الأسباب المشروحة تحت T. aureoviride يقود الأعتقاد أن T. glaucum Abbot ( 1962 ) من المحتمل أنها من T. viride شكل fig 18
ولقد لاحظ Webster ( 1964 ) أن سلسلتين من هذه الجراثيم الأسكية ل H. rufa تفرز صبغة صفراء لامعة فى البيئة ولقد لوحظ هذا أيضاً فى بعض عزلات من التربة لهذه الأنواع ولكن فى معظم الأنواع المدروسة لا يوجد أى إختزال فى لون البيئة يحدث مع إستثناءات قليلة للمزارع القديمة ل T. viride من على جوز الهند مما يجعل مقارنة ومعرفة هذه الأنواع أكثر سهولة حتى فى الحقل فى بعض الأحيان .
تسمية وتقسيم عزلات التربة المتجرثمة الشبه كروية ل T. Lignorum اشار إليها العديد من علماء الفطريات عند مناقشة T. harzianum ولقد كتب Bainier ( 1906 ) عن الأجناس التى أشير إليها سابقاً ب T. lignorum
ب T. truncorum حيث لم يعطى الشرح أو الوصف الإسم الدقيق وقد أعتبر الأخير على أنه nomen nudum ولقد عومل هنا على أنه مرادف حتمى ل T. lignorum ومن ثم مرادف ل T. viride .
وفى حالة ما إذا كان Bisby ( 1939 ) محقاً فى وصفه لـ phialospores لـ T. narcissi على أنها كروية أو بيضة مفلطحة وخشنة قليلا قطرها 3 - 4 (5) m فإن هذه الأنواع يجب أيضاً أن تدرج ضمن T. viride على الرغم من أن ( tochinoi – Shimada 1930 - 1931 ) لم يغير ما دليلاً على وجود أوعدم وجود علامات على جراثيم T. norcissi وشرحها ل phialides وجراثيمها كان لحد ما مشابه ل T. viride ولقد أشار(1953) pidoplichko وأطلق T. lignorum على الأنواع الحالية لكن أيا من التسمية أو الشرح لم يكن كافياً نظراً لوجود العزلات من Trichoderma الخشن والناعمة الجراثيم والتى لا يمكن أهمالها أضف إلى ذلك أن إسم الصنف لم يكن مدرجاً وطبقاً ل Von hohnel ( 1916 ) لم يكن متوافق مع T. viride . الجراثيم الأسكية للعزلة shd- m2611 المشار إليها سابقاً والتى وصفت وشرحت بواسطة Webster ( 1964 ) سيعاد شرحها كممثلة ل T. viride .
فى المزارع تنمو المستعمرات بسرعة حيث تغطى 9سم من أطباق بترى فى حوالى 4 أيام على 20م وفى 3.5يوم على 25م وتكون فى البداية كتلة من الميسليوم الناعم المائى الأبيض والذى يصبح فيما بعد شعيرى من جراء تكوين هيفات هوائية مفككة مما يجعل المستعمرات تظهر بشكل ما بيضاء . وعند النضج تميز المساحة الكويندية بالأخضر الغامق وأخضر غامق لامع فيما يظل الجانب العكسى غير ملون ويتكون المسليوم من حواجز ناعمة مفككة متفرعة قطرها 1.5 - 12m وغالباً تكون هذه الهيفات جراثيم كويندية والتى تظهر على إمتداد الهيفا أو نادراً تكون طرفياً على أفرع جانبيه وغالياً تكون كروية أو نادراً أهليجية مفككة ناعمة الجدر قطرها يصل إلى 14m وغالباً تكون مغمورة فى البيئة وتظهر الحوامل الكويندية المتفرعة فى خصلات مندمجة أو مفككة والتى غالباً ما تكون منطقة دائرية مكتملة أو غير مكتملة وخارج هذه المنطقة يكون الكونديات أقل تعقيد وتمتد بشكل غير منتظم على إمتداد سطح المزرعة والأفرع الرئيسة للحوامل الكويندية والتى يصل قطرها 4.5 m تنتج العديد من الأفرع الجانبية والتى تظهر بشكل فردى أو فى مجاميع من 2 أو 3 وبشكل غير منتظم عادة وعادة ما تظهر هذه الأفرع الجانبية بزيادة فى الطول ببعدها عن القمة لحاملها وتنتج أكبرها غالباً أفرع جانبية أصغر منها وهكذا مما يعطى نظام تفريع conifer - like وغير منتظم وتقف كل الأفرع ناحية الزاوية الواسعة لحاملها وينتهى ال apices ب phialides وتتكون ال phialides فى قرون كاذبة أسفل كل phialide طرف وكل مجموعة عادة ما تكون من 2 أو 3 phialides وقد يحدث أن تظهر بشكل فردى أو فى أزواج متعاكسة على إمتداد الأفرع وقد تتابين فى الحجم فقد تصل إلى 2.4 - 3 m × 8-14 وقد يكون أيضا حوالى 6m فى الطول فى حين أن الذى phialide فى نهاية الفرع قد يصل على 20m وكما هو الحال فى الحوامل الكويندية فإن ال phialides تصطف على الزاوية الواسعة لحاملها وتكون مستقيمة أو منحنية قليلاً مثل nine - pin - shoped ضيقة فى القاعدة وأوسع فى إتجاه الوسط مع رقبة طويلة نسبياً أما الجراثيم phialospores وتكون كروية أو بيضة قصيرة أو أهليجية مفلطحة أحياناً لها قاعدة تشبة apiculus - like base ونظراً لوجود خشونة على جدرها فإنها قد تظهر بزوايا أحياناً . وذات لون أخضر ويصل قطرها إلى 3.6 - 4.5 m أو 3.5 - 4 m × 4- 4.8 وتتجمع فى قمة كل phialode لتكون رأس كويندى كروى .
الملخص
بالرغم من الإدعاءات بأن hyphomycete لجنس TRICHODERMA لا يمكن تمييزها عن بعضها فإن صفات تكوينية فى المزرعة لـ Trichoderma لمختلف الأنواع لـ Pyrenomycetes لجنس hypocrea يبين أن هناك خصائص صغيرة ولكنها مهمة والتى يمكن إستخدامها فى تصنيف الفطريات والتى يكون فيها مجاميع الأنواع متوافقة معاً وعلى اساس نظام التفريع للحوامل الكويندية وحالة وضع ال phialides وخصائص جراثيم phialospores فإنه يمكن من السهل التعرف على تسعة أنواع من المجاميع وصف وشرح هذه التسعة أنواع والتى تتكون من ثلاث أنواع تقليدية T. koningii , T. hamatum , T. viride وواحد أخر من التكوينات الجديدة T. Polysoporum بالإضافة إلى أنواع أخرى T. harzianum , T. ovreoviride . T. piluliferum , T. pseudokoningii , T. longibrachiatum تغييرات مزرعية ومورفولوجية لكل نوع تعليقات الشمسية العلمية الشائعة وتعليقات التقسيمية ومناقشة تلك الحدود والملامح والشكل العام على الجنس نفسة
ليست هناك تعليقات:
إرسال تعليق